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顯微鏡小知識(一)

  • 更新日期:2024-05-28      瀏覽次數:1223
    • 一、顯微鏡概述

      顯微鏡是用來幫助人眼觀察近距離細小目標的一種目視光學儀器,早期的顯微鏡由物鏡和目鏡組合而成,顯微鏡物鏡的作用是把被觀察的物體放大為一個實像,并成像在目鏡的焦面上,然后通過目鏡成像在無限遠,供人眼觀察。后來隨著數字成像技術的發展,采用CCD等電子設備代替人眼進行觀察成為主流顯微鏡的選擇,而不斷深入的顯微技術研究,使得無限遠共軛距的物鏡應用也越來越廣,因為它可以更方便地在系統中增加各種特殊組件,來適應各種特殊分析的需求。

      顯微鏡發展至今,其種類和功能越來越豐富和完善,下圖簡單列出不同種類顯微鏡種類以供參考,其中我們將重點討論的是光學顯微鏡

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      一臺顯微鏡或顯微系統最重要的性能是分辨率,分辨率的高低主要是由顯微物鏡決定的顯微物鏡是系統中最關鍵的部件,它是“小像差系統",各種軸上和近軸像差,如球差,慧差,縱向色差等都需要嚴格矯正,其設計及加工都相當不易,以下將對顯微物鏡進行詳細介紹。

      、顯微物鏡分類

      共軛距分類

      根據國家標準GB/T 2609-2015,顯微物鏡分為機械筒長為160mm的物鏡和無限遠共軛距物鏡兩類。第一類物鏡也被稱為有限遠共軛物鏡,機械筒長為160mm(機械筒長指的是顯微鏡筒上端面,也即目鏡的定位端面,與顯微鏡物鏡轉換面的距離)。

      如下圖所示,有限遠共軛物鏡需要與目鏡配合使用,才能被人眼觀察到。如果直接采用CCD進行觀察,CCD需要被準確放置在物鏡的像面上(紅色所示表面)。或者采用一端為物鏡螺紋一端為C-mount的轉接筒,連接顯微物鏡和CCD,可正確成像。

      無限遠共軛距物鏡包含了物鏡(Objective)和筒鏡(Tube lens)兩部分,必須配合使用才能獲得物鏡標稱的倍率β。

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      | 像差矯正水平分類

      根據像差校正情況不同,顯微鏡物鏡通常被分為消色差物鏡、半復消色差物鏡、復消色差物鏡,平像場物鏡、平場復消色差物鏡。另外還有一類折反物鏡,由于具有反射器件,像差矯正略有區別。需要留意的是平像場物鏡也具備了消色差的矯正水平,只是進一步矯正了場曲,在整個視場中可以獲得平坦的清晰成像。

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      | 觀察時物空間使用的介質分類

      當顯微物鏡的分辨率要求時,一般會要求比較大的NA,此時會用到折射率較空氣更高的介質,如:水,甘油等進行觀察。因此物鏡也被分為干物鏡和浸液物鏡,前者使用在空氣介質中,后者使用在水,甘油,硅油中,分辨率更高,倍率一般更大。

       特種物鏡

      特種物鏡是在常規物鏡的基礎上,針對其特殊的應用方向設計開發的物鏡,一般具有比較明顯的特征。

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